Prof.Dr.Luis Carlos Figueira de Carvalho

PROTEASES

1. As proteases (EC 3.4) são enzimas que pertencem ao grupo: a) Oxirredutases; b) Transferases; c) hidrolases; d) liases; e) Isomerases
2. Em relação as proteases, é incorreto afirmar: a)Sua principal função biológica é a hidrólise de proteínas e estão envolvidas nos processos de digestão, ativação de enzimas, coagulação sanguínea e no transporte de proteínas através de membranas; b) Catalisam as reações de hidrólise das ligações glicosídicas das proteínas e podem ainda apresentar atividade sobre ligações éster e amida; c) Apresentam um certo grau de especificidade de substrato, em geral relacionado aos aminoácidos envolvidos na ligação peptídica a ser hidrolisada e àqueles adjacentes a eles; d) A posição da ligação na cadeia influenciar a atividade das proteases; e) As proteases (EC 3.4) são enzimas que pertencem ao grupo das hidrolases;
3. A principal função biológica das proteases  é a hidrólise de proteínas e estão envolvidas nos processos de: a)Digestão; b) Ativação de enzimas; c) Coagulação sanguínea; d)Transporte de proteínas através de membranas; e) Todas estão corretas
4. Em relação a utilização industrial das proteases, considere as seguintes afirmativas: I - A indústria de detergentes é a maior consumidora de proteases, devido a incorporação da subtilisina (extraída de Bacillus licheniformis) em detergentes em pó; II – A indústria de alimentos é a segunda maior consumidora de protease; III – As proteases são usadas na produção de couros, para a remoção de pelos e para a promoção da flexibilidade e maciez. Conclui-se que: a) Somente afirmativas I e II são verdadeiras; b) Somente as afirmativas, I e III são verdadeiras; c) Somente as afirmativas, II e III são verdadeiras; d) Somente a afirmativa I é verdadeira; e) Todas as afirmativas são verdadeiras;
5. As aminopeptidases: a) Agem na extremidade N-terminal da cadeia polipeptídica; b) liberam aminoácidos livres, dipeptídeos ou tripeptídeos; c) Geralmente são metalo-proteases; d) São exopeptidases; e) Todas estão corretas;
6. As carboxipeptidases: a) Agem na extremidade C-terminal da cadeia polipetidica; b) Liberam aminoácidos livres ou dipeptídeos; c) Podem ser serino-proteases ou cisteína-proteases; d) Podem ser metalo-proteases; e) Todas estão corretas;
7. As serina-proteases (EC 3.4.24) são caracterizadas pela presença do aminoácido serina no sitio ativo. A respeito dessa enzima, considere as seguintes afirmativas: I – São inibidas irreversivelmente por 3,4-dicloroisocumarina (3,4-DCI), diisopropilfluorofosfato (DFP) e Fluoreto de fenilmetilsulfonila (PMSF); II – São em geral, ativa em pH de 7,0 a 11,0 e podem apresentar atividade sobre ligações éster e amida; III – O principal grupo desse tipo de proteases é formado pelas serina proteases alcalinas, como tripsina, quimotripsina e subtilisina, que apresentam alta especificidade de substrato. Conclui-se que: a) Somente afirmativas I e II são verdadeiras; b) Somente as afirmativas, I e III são verdadeiras; c) Somente as afirmativas, II e III são verdadeiras; d) Somente a afirmativa III é verdadeira; e) Todas as afirmativas são verdadeiras;
8. Cisteína-proteases ou proteases sulfidrílicas (EC 3.4.22): a) Apresentam em seu sítio ativo cisteína conjugada com histidina; b) São, normalmente, mais ativas em meios de pH neutro, podendo apresentar atividades em valores de pH ácido; c) São ativadas na presença de agentes redutores e inativadas por agentes oxidantes e substâncias que reagem com grupo sulfidril, como  p-cloromercúriobenzoato (PCMB); d) As proteases vegetais, como papaína, bromelina e ficina, são as principais cisteína-proteases; e) Todas estão corretas;
9. Cisteína-proteases ou proteases sulfidrílicas (EC 3.4.22) São ativadas na presença de agentes redutores e inativadas por agentes oxidantes e substâncias que reagem com grupo sulfidril, como: a)   p-cloromercúriobenzoato; b) 3,4-dicloroisocumarina (3,4-DCI); c) Diisopropilfluorofosfato (DFP); d) Fluoreto de fenilmetilsulfonila (PMSF); e)Todas estão corretas.
10. As serino proteases são inibidas irreversivelmente por: a) 3,4-dicloroisocumarina (3,4-DCI); b) Diisopropilfluorofosfato (DFP); c) Fluoreto de fenilmetilsulfonila (PMSF); d) Diisopropilfluorofosfato (DFP) e  Fluoreto de fenilmetilsulfonila; e) Todas estão corretas
11. Metalo-proteases (EC 3.4.24), enzimas que dependem de íons metálicos divalentes para sua atividade são inibidas por agentes quelantes, como: a) Ácido etilinodiaminotetracético (EDTA); b) 3,4-dicloroisocumarina (3,4-DCI); c) Diisopropilfluorofosfato (DFP); d) Fluoreto de fenilmetilsulfonila (PMSF); e)Todas estão corretas.
12. Proteases aspárticas ou ácidas (EC 3.4.23): a)São inibidas por 1,2-epoxi-3-p-nitrofenoxipropano (EPNP), na presença de íons de cobre; b) Em geral, apresentam maior atividade em valores de pH ácido; c)Tem maior afinidade por ligações que envolvem aminoácidos apolares e aromáticos; d) Entre as principais proteases ácidas estão a pepsina e renina; e) Todas estão corretas
13. As Proteases aspárticas podem ser isoladas de qual dos seguintes microrganismos: a) Aspergillus; b) Penicillium; c) Rhizopus; d) Neurospora; d) Endothia e Rhizomucor; e) Todas estão corretas
14. Em relação as Metalo-proteases (EC 3.4.24), considere as seguintes afirmativas: I – Dentre as neutras, encontram-se as colagenases de Clostridium hystoliticum e elastase de Pseudomonas aeruginosa, além da termolisina, uma protease neutra comercial de alta termorresistência, produzida por Geobacillus stearothermophilus; II – Entre as alcalinas, estão as proteases dos gêneros Serratia e Myxobacter, com atividade em pH de 7,0 a 9,0; III - Dependem de íons metálicos divalentes para sua atividade são inibidas por agentes quelantes, como  Ácido etilinodiaminotetracético (EDTA). Conclui-se que: a) Somente afirmativas I e II são verdadeiras; b) Somente as afirmativas, I e III são verdadeiras; c) Somente as afirmativas, II e III são verdadeiras; d) Somente a afirmativa III é verdadeira; e) Todas as afirmativas são verdadeiras;
15. Papaina (EC 3.4.22.2): a) É uma cisteína-protease extraída do látex dos frutos do mamoeiro (Carica papaya); b) Apresenta atividade proteolítica em valores de pH de 5,0 a 9,0; c) Para os substratos caseína e albumina, seu pH ótimo de atuação é 7,0; d) Sua atividade ótima é observada em temperaturas de 66 a 70ºC; e) Todas estão corretas
16. Papaina (EC 3.4.22.2), uma cisteína-protease extraída do látex dos frutos do mamoeiro (Carica papaya) apresenta atividade proteolítica em valores de pH de 5,0 a 9,0, no entanto, para os substratos caseína e albumina, seu pH ótimo de atuação é: a)ácido;  b) Neutro;  c) Basico;  d) Ácido ou Básico, dependendo da concentração; e) Ácido ou Básico, dependendo da temperatura
17. Papaina (EC 3.4.22.2): a) Permanece estável até 90ºC; b) Apresenta ainda atividade sobre ligações éster e amida e tem boa atuação na síntese de peptidios; c) Apresenta baixa especificidade de substrato; d) Hidrolisa preferencialmente ligações adjacentes aos aminoácidos fenilalanina, valina e leucina; e) Todas estão corretas.
18. Cisteína-protease extraída do pendúnculo ou do fruto do abacaxizeiro (Ananas comosus): a) Bromelina; b) Ficina; c) Papaína; d) Subtilisina; e) Comosina.
19. As bromelinas (EC 3.4.22.4): a) Cisteína-protease extraída do pendúnculo ou do fruto do abacaxizeiro (Ananas comosus); b) Tem atividade ótima em pH 6,0 a 8,0; c) Menos estável que a papaína; d) Perde rapidamente a sua atividade a temperatura superior a 70ºC; e) Todas estão corretas.
20. Ficina (EC 3.4.22.3): a) É extraída do látex de diversas espécies do gênero Ficus; b) Apresenta maior atividade em valores de pH de 6,0 a 8,0; c) estávela temperatura de 60ºC; d) Apresenta baixa especificidade de  substrato e hidrolisa ligações que envolvem diversos aminoácidos; e) Todas estão corretas.
21. São proteases gástricas e pancreáticas, respectivamente: a) Renina e pepsina; b) Tripsina e quiotripsina; c) Renina e Tripsina; d)Quimiotripsina e pepsina; e) Tripsina e Renina.
22. Renina (EC 3.4.23.15): a) É uma protease aspártica extraída do quarto estômago (abomaso) de bezerros não desmamados; b)É inativada em pH neutro ou alcalino e perde gradualmente sua atividade em pH de 3,5 a 4,5 por autodigestão; c) Como outras enzimas gástricas, a renina é sintetizada na forma de pró-renina inativa; d)  A pró-renina é convertida em renina por hidrólise parcial que libera um peptídeo de sua cadeia protéica; e) Todas estão corretas.
23. Em relação as Pepsina (EC 3.4.23.1), é incorreto afirmar: a) São proteases aspártica produzida pela mucosa do estômago na forma inativa de pepsinogênio; b) Em pH abaixo de 5,0, torna-se ativa por hidrólise; c) Em pH acima de 5,0, as partes do peptídeo que foram removidas para sua ativação funcionam como inibidores alostéricos reversíveis da pepsina, sendo removidos quando o pH cai novamente; d) Apresenta maior atividade na faixa de pH de 1,0 a 4,0, mas seu ótimo é 1,8; e) Inativa-se completamente em pH superior a 6,0;
24. Em relação as Pepsina (EC 3.4.23.1), é incorreto afirmar: a)Sua atividade é bastante influenciada pelo substrato; b) Apresenta alta especificidade, preferindo  ligações peptídicas que envolvam aminoácidos ácidos; c) Em pH acima de 5,0, as partes do peptídeo que foram removidas para sua ativação funcionam como inibidores alostéricos reversíveis da pepsina, sendo removidos quando o pH cai novamente; d) Apresenta maior atividade na faixa de pH de 1,0 a 4,0, mas seu ótimo é 1,8; e) Inativa-se completamente em pH superior a 6,0;
25. Em relação as proteases, considere as seguintes afirmativas: I - A quimotripsina (E.C. 3.4.21.1) é específica para ligações peptídicas contendo resíduos de aminoácidos com cadeias laterais hidrofóbicas em R1, como a fenilalanina (Phe), tirosina (Tyr) e triptofano (Trp); II - A tripsina (E.C. 3.4.21.4) é específica para ligações peptídicas contendo resíduos com cadeia lateral com carga elétrica positiva, em condições fisiológicas, tais como a arginina (Arg) e lisina (Lys), na posição R1; III - Entre as serino proteases mais bem estudadas figuram as enzimas digestivas quimotripsina e tripsina, ambas sintetizadas e secretadas pelo pâncreas exócrino sob a forma inativa (zimógenos ou zimogênios). Conclui-se que: a) Somente afirmativas I e II são verdadeiras; b) Somente as afirmativas, I e III são verdadeiras; c) Somente as afirmativas, II e III são verdadeiras; d) Somente a afirmativa III é verdadeira; e) Todas as afirmativas são verdadeiras
26. Em relação a Tripsina (EC 3.4.21.4), é incorreto afirmar : a) Serino protease secretada pelo pâncreas, é uma das enzimas digestivas mais importante; b) É sintetizada na forma ativa de tripsinogênio no pâncreas de animais superiores e é inativada por hidrólise no duodeno; c) Sua regulação é feita pela síntese de inibidores de tripsina, também sintetizadas pelo pâncreas e que controlam a ação dessa enzima quando está presente em pequenas quantidades; d) São endopeptidases altamente específicas que só hidrolisam ligações que envolvem grupos carboxílicos da lisina e da arginina; e) São estáveis em pH baixo de 6,0 e sofrem autólise a partir desse valor.
27. Em relação a Tripsina (EC 3.4.21.4), é correto afirmar : a)Sua atividade ótima ocorre em pH de 7,0 a 9,0, característico do intestino; b) É sintetizada na forma inativa de tripsinogênio no pâncreas de animais superiores e é ativada por hidrólise no duodeno; c) Inibidores de tripsina são peptídeos produzidos pelo pâncreas, mas estão presentes na soja, no trigo e em outros alimentos;  d) Os inibidores de tripsina contidos em alimentos a base de soja e em rações devem ser considerados, pois eles reduem expressivamente o valor nutricional do alimento; d) Todas estão corretas;
28. Quimotripsina ( EC 3.4.21.1): a) É uma serino-protease bastante semelhante à tripsina e também é sintetizada como zimogênio pelo pâncreas; b) Apresenta duas frações de propriedades semelhantes; c) Hidrolisa preferencialmente ligações que envolvem aminoácidos aromáticos, mas pode também hidrolisar ligações entre todos os aminoácidos hidrofóbicos; d) É estável em pH ácido e neutro e apresenta pH ótimo de atividade de 7,0 a 9,0; e) Todos estão corretas.
29. Quimotripsina ( EC 3.4.21.1), uma serino-protease bastante semelhante à tripsina e também é sintetizada como zimogênio pelo pâncreas. Apresenta duas frações de propriedades semelhantes e hidrolisa preferencialmente ligações que envolvem os seguintes aminoácidos: a)Aspartato, glutamato e glutamina; b)tirosina, fenilalanina e triptofano; c) Arginina, histidina e lisina; d)Serina, treonina, asparagina; e) Todas estão corretas.
30. Em relação as proteases bacteriana, é incorreto afirmar: a) A maior parte das proteases comerciais é produzida por bactérias dos gêneros Bacillus e Geobacillus; b) As proteases bacteianas neutras são ativas em valores de pH de 5,0 a 8,0; c) Apresentam alta estabilidade térmica e alta especificidade; d) Embora tenham preferência por ligações entre aminoácidos hidrofóbicos, o grau de hidrólise pode ser controlado por alterações no pH e na temperatura da reação proteolítica; e) As proteases bacterianas alcalinas apresentam maior atividade em pH de 8,0 a 11,0 e a temperatura de 50 a 60º.C;
31. Em relação as proteases fungicas, é correto afirmar:a) Uma única espécie de fungo Poe produzir diferentes proteases (alcalinas, neutras e ácidas); b) Aspergillus oryzae produz três proteases extracelulares, de modo que o extrato obtido por fermentação apresenta atividade proteolítica em valores de pH de 4,0 a 11,0; c) Sua temperatura ótima de atividade é observada em torno dos 40ºC e essas proteases são inativadas em temperatura acima de 50ºC; d) Em geral, são ativas em pH de 4,0 a 4,5 e as neutras em pH 7,0; e) Todas estão corretas
32. Após a fermentação alcoólica, a cerveja passa por um período de maturação a baixa temperatura (cerca de 0º.C). A duração depene do tipo de cerveja, varia de poucos dias a várias semanas e sua principal finalidade é destruição de diacetil, uma substância de sabor desagradável que se acumula no produto durante a fermentação. Ao longo da matuação, o diacetil é transformado em acetoína, que não apresenta sabor. Esse processo pode ser acelerado pela adição de qual das seguintes enzmas?  a) Acetolato-descarboxilato e diacetil-redutase; b) Acetolato-transferase; c) Diacetil-oxidoredutase; d) papaína e pepsina;  e) Subtilisina e tripsina.
33. Maturação do queijo as importantes modificações de textura e aroma são devidas, principalmente, às proteases e lipases que geram, respectivamente: a) Aminoácidos e aminas; b) Compostos sulfurados e tiol-ésteres; c)Compostos sulfurados e cetonas; d) Cetonas e lactonas; e) Lactonas e ácidos graxos.
34. Em relação a produção do queijo, considere as seguintes afirmativas: I – O processo de maturação exige condições de temperatura e umidade controladas e consiste na decomposição de gorduras, proteínas e carboidratos da massa do queijo provocada pela cultura starter (bactéria lácticas), do coalho e de eventuais microbiotas secundários; II - As importantes modificações de textura e aroma são devidas, principalmente, às proteases que geram peptideos, aminoácidos, aminas, compostos sulfurados e tiol-ésteres, e às lípases que geram cetonas, lactonas e ácidos graxos; III – A proteólise é um  dos mais importantes processos de maturação de queijo, pois peptidios e aminoácidos livres, gerados pela ação de proteases, são precursores de sabor, além de serem fontes de nitrogênio para microbiota secundária. Conclui-se que: a) Somente afirmativas I e II são verdadeiras; b) Somente as afirmativas, I e III são verdadeiras; c) Somente as afirmativas, II e III são verdadeiras; d) Somente a afirmativa III é verdadeira; e) Todas as afirmativas são verdadeiras;
35. O desempenho de uma protease na coagulação de leite para a produção de queijo pode ser avaliado pela relação entre sua capacidade para formar coágulo e a hidrólise total das caseínas do leite. As enzimas mais utilizadas nesse processo é: a)Quimiotripsina; b) Renina ou quimiosina; c) Subtilisina; d) Papaina; e) Carboxipeptidase.
36. Em relação ao processo de maturação da cerveja, considere as seguintes afirmativas: I – A turvação, um processo que ocorre durante a maturação da cerveja, ocorre pela nteração de compostos fenólicos e polipeptideos, provenientes do malte e de cereais não-maltados, que se imobilizam em temperatura baixa; II – As proteases hidrolisam os peptídeos e impedem que eles  insolubilizem, evitando a turvação da cerveja durante o processo de maturação; III – Em geral, no processo de clarificação da cerveja são usadas papaínas, que são proteases com baixa especificidade e que hidrolisam peptídeos de diferentes fontes. Conclui-se que: a) Somente afirmativas I e II são verdadeiras; b) Somente as afirmativas, I e III são verdadeiras; c) Somente as afirmativas, II e III são verdadeiras; d) Somente a afirmativa III é verdadeira; e) Todas as afirmativas são verdadeiras;
37. Em relação ao processo de amaciamento da carne (tenderização enzimática) considere as seguintes afirmativas: I - Dentre as enzimas proteolíticas, as de origem vegetal (papaína) são as mais utilizadas para esse fim; II - Apesar de apresentar menor atividade  sobre o colágeno que a bromelina e a ficina, a papaína é bastante eficiente por sua alta afinidade pela actina e boa atividade sobre o colágeno desnaturado pelo calor; III – A papaína apresenta temperatura de atividade de 60ºC a 70ºC, o que evita hidrólise durante o armazenamento da carne a frio, e alta estabilidade térmica, o que garante o amaciamento durante o cozimento, pois a enzima mantém-se ativa por longo período a altas temperaturas. Conclui-se que: a) Somente afirmativas I e II são verdadeiras; b) Somente as afirmativas, I e III são verdadeiras; c) Somente as afirmativas, II e III são verdadeiras; d) Somente a afirmativa III é verdadeira; e) Todas as afirmativas são verdadeiras;